ILUSTRISIMOS SEÑORES:

EL REGLAMENTO DE LA CEE 890/1978, DE LA COMISION, RELATIVO A LAS MODALIDADES DE CERTIFICACION DEL LUPULO, ESTABLECE LAS EXIGENCIAS MINIMAS DE COMERCIALIZACION DE DICHO PRODUCTO.

SIENDO NECESARIO FIJAR LA RIQUEZA EN A-ACIDOS Y NO FIGURANDO METODO OFICIAL EN EL MENCIONADO REGLAMENTO, SE HACE PRECISO ESTABLECER UN PROCEDIMIENTO OFICIAL QUE PERMITA ASEGURAR UNA CORRECTA VALORACION DEL CONTENIDO EN ESTE ELEMENTO.

POR TODO LO ANTERIOR HE TENIDO A BIEN DISPONER:

ARTICULO 1. SE APRUEBA COMO OFICIAL EL METODO DE ANALISIS PARA LA DETERMINACION DE A-ACIDOS EN LUPULO QUE FIGURA EN EL ANEXO.

ART. 2. CUANDO NO EXISTAN METODOS OFICIALES PARA DETERMINADOS ANALISIS DEL LUPULO, Y HASTA QUE SEAN ESTUDIADOS POR EL GRUPO DE TRABAJO CORRESPONDIENTE, PODRAN SER UTILIZADOS LOS ADOPTADOS POR ORGANISMOS NACIONALES O INTERNACIONALES DE RECONOCIDA SOLVENCIA.

ART. 3. LA PRESENTE DISPOSICION ENTRARA EN VIGOR AL DIA SIGUIENTE DE SU PUBLICACION EN EL <BOLETIN OFICIAL DEL ESTADO>.

MADRID, 26 DE JULIO DE 1988.

ROMERO HERRERA

ILMOS.

SRES. DIRECTORES GENERALES DE POLITICA ALIMENTARIA Y PRODUCCION AGRARIA.

ANEXO

DETERMINACION DE A-ACIDOS EN LUPULO

1. PRINCIPIO

EL LUPULO SE EXTRAE CON UN DISOLVENTE ORGANICO APROPIADO Y SE MIDE EL CONTENIDO DE AY B-ACIDOS POR ESPECTROFOTOMETRIA.

2. MATERIAL Y APARATOS

2.1 BALANZA ANALITICA.

2.2 AGITADOR MECANICO.

2.3 RECIPIENTES DE EXTRACCION CON CIERRE INERTE, POR EJEMPLO MATRAZ ERLENMEYER DE 250 ML CON JUNTA DE TEFLON O CIERRE DE POLIETILENO.

2.4 ESPECTROFOTOMETRO PARA LUZ U.V. CON CELULA DE LECTURA DE 1 CENTIMETRO.

3. REACTIVOS

3.1 BENCENO, REACTIVO PARA ANALISIS.

SU ABSORBANCIA MEDIDA EN UNA CELULA DE 1 CM DE RECORRIDO A UNA LONGITUD DE ONDA DE 275 NM CUANDO SE DILUYE CON METANOL ALCALINO AL 1 POR 100 Y SE LEE CON RESPECTO AL AGUA DEBE SER MENOR QUE 0,110.

3.2 TOLUENO, REACTIVO PARA ANALISIS. SU ABSORBANCIA EN LAS MISMAS CONDICIONES QUE EL ANTERIOR DEBE SER MENOS QUE 0,8.

3.3 METANOL, REACTIVO PARA ANALISIS. SU ABSORBANCIA MEDIDA EN UNA CELULA DE 1 CM DE RECORRIDO A UNA LONGITUD DE ONDA DE 275 NM DEBE SER MENOR QUE 0,060.

3.4 SOLUCION DE HIDROXIDO SODICO 6N.

3.5 METANOL ALCALINO. AGREGAR 0,2 ML DE HIDROXIDO SODICO 6N A 100 ML DE METANOL. LA SOLUCION SE DEBE PREPARAR DIARIAMENTE.

4. PROCEDIMIENTO

INTRODUCIR 5,000 +- 0,001 G DE LUPULO MOLIDO RECIENTEMENTE EN UN RECIPIENTE PARA EXTRACCION DE 250 ML Y AGREGAR 100 ML DE BENCENO O TOLUENO. TAPAR HERMETICAMENTE Y AGITAR DURANTE TREINTA MINUTOS CON UN AGITADOR MECANICO QUE PRODUZCA UNA AGITACION VIGOROSA.

CENTRIFUGAR A 2000 RPM DURANTE CINCO MINUTOS (O DEJAR REPOSAR HASTA QUE LA FASE SOLIDA SE DEPOSITE LO SUFICIENTE PARA PERMITIR RECOGER UNA PARTE ALICUOTA LIMPIDA. EL TIEMPO NO DEBERA EXCEDER DE UNA HORA). ESTA SOLUCION CONTENDRA EL EQUIVALENTE DE 50 MG/ML DE LUPULO.

DILUIR 5 ML DE EXTRACTO LIMPIDO CON METANOL (SOLUCION A).

DILUIR UNA PARTE ALICUOTA APROPIADA DE LA SOLUCION A CON METANOL ALCALINO (SOLUCION B) DE FORMA QUE LA ABSORBANCIA A 325 Y 355 NM CAIGA DENTRO DEL RANGO MAS FIABLE DEL INSTRUMENTO USADO. LA LECTURA SE DEBE HACER INMEDIATAMENTE DESPUES DE HABER PREPARADO LA SOLUCION B.

DETERMINAR LA ABSORBANCIA DE LA SOLUCION B A 355, 325 Y 275 NM, COLOCANDO PREVIAMENTE EL INSTRUMENTO A 0 CON UNA MUESTRA EN BLANCO QUE SE PREPARA DILUYENDO 5 ML DEL DISOLVENTE EN LA MISMA SECUENCIA QUE LA MUESTRA. LA LECTURA SE DEBE HACER RAPIDAMENTE PARA EVITAR LA DESCOMPOSICION DE LOS COMPONENTES POR LA LUZ U.V.

5. CALCULO

A) FACTOR DE DILUCION,

D= VOLUMEN DE LA SOLUCION A (ML) X VOLUMEN DE LA SOLUCION B (ML)

(PARTIDO POR)

500 X ALICUOTA EXTRACTO (ML) X ALICSOLUCION A (ML)

EN DONDE <500> PROVIENE DE:

100 ML EXTRACTO X 100 (%)

(PARTIDO POR)

5 G MUESTRA X 1.000 (G/ML A MG/L)

REQUIRIENDOSE UN FACTOR DE CONVERSION PUESTOQUE LAS ECUACIONES DE ABSORBANCIA DAN LAS CONCENTRACIONES DE AY B-ACIDOS EN MG/L

B) A-ACIDOS (%) = D X (-51,56 A 355 + 73,79 A 325 19,07 A 275 )

C) B-ACIDOS (%) = D X (55,57 A 355 47,59 A 325 + 5,10 A 275 )

DONDE D ES EL FACTOR DE DILUCION Y A 355 , A 325 Y A 275 SON LAS ABSORBANCIAS PARA LAS LONGITUDES DE ONDA A LAS QUE SE MIDE LA SOLUCION B. LOS RESULTADOS SE EXPRESAN CON UNA CIFRA DECIMAL.